流式細胞技術
流式細胞技術（flow cytometry,FCM）是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。流式細胞術是單克隆抗體及免疫細胞化學技術、激光和電子計算機科學等高度發(fā)展及綜合利用的高技術產(chǎn)物。
流式細胞儀由三部分構成
1.液流系統(tǒng)，包括流動室和液流驅(qū)動系統(tǒng)；
2.光學系統(tǒng)，包括激發(fā)光源和光束收集系統(tǒng)；
3.電子系統(tǒng)，包括光電轉(zhuǎn)換器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。流式細胞儀的工作原理是使懸浮在液體中分散的經(jīng)熒光標記的細胞或微粒逐個通過樣品池，同時由熒光探測器捕獲熒光信號并轉(zhuǎn)換成分別代表前向散射角、側向散射角和不同熒光強度的電脈沖信號，經(jīng)計算機處理形成相應的點圖，直方圖和加三維結構圖像進行分析。
用于FCM的樣本是單細胞懸液，可以是血液、懸浮細胞培養(yǎng)液、各種體液、新鮮實體瘤的單細胞懸液以及石蠟包埋組織的單細胞懸液等。
基本原則
1.使各種液體和懸浮細胞樣本新鮮，盡快完成樣本制備和檢測；2.針對不同的細胞樣本進行適當洗滌、酶消化或EDTA處理，以清除雜質(zhì)，使粘附的細胞彼此分離而形成單細胞狀態(tài)；3.對新鮮實體瘤組織可選用或聯(lián)用酶消化法，機械打散法和化學分散法來獲得足夠數(shù)量的單細胞懸液；4.對石蠟包埋組織應先切成若干40-50um厚的蠟片，經(jīng)二甲苯脫蠟到水后，再用前述方法制備單細胞懸液；5.單細胞懸液的細胞數(shù)不應少于10000個。
流式細胞技術的應用：
1.其測定細胞內(nèi)DNA的變異系數(shù)最小，一般在2%以下；
2.能準確地進行DNA倍體分析；
3.借助于熒光染料進行細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的定量研究；
4.快速進行細胞分選和細胞收集；
5.醫(yī)學應用：免疫功能研究各種干細胞的檢測，癌癥病人的多藥耐藥性，細胞功能及代謝動力學研究，血小板分析（心血管疾病），流式細胞術與分子生物學研究；
6 應用于外周血內(nèi)皮細胞測定、調(diào)節(jié)性T細胞等尖端領域。
